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文献信息：

Abe, T, et al (2017) "Germ-Cell-Specific Inflammasome Component NLRP14 Negatively Regulates Cytosolic Nucleic Acid Sensing to Promote Fertilization" Immunity 46 (4): 621-634

先看一下图中的缩写：

IP全称是immunoprecipitation，即免疫沉淀，这一步主要是为了纯化目的蛋白。

IB全称是immunoblotting，即免疫印迹，也就是常规的Western Blotting，用于显示目的蛋白。

WCL全称是whole cell lysates，即整个细胞的裂解成分。

HC全称是heavy chain，即重链，

LC全称是light chain，即轻链。

将图分为三部分，先看第一部分，即上面的部分，“+”表示含有这种蛋白，“-”表示没有，这个实验一共做了四组，从左到右分别为：①只表达HA-cGAS的293T细胞；②共同表达HA-cGAS与NRLP14-FL的293T细胞；③只表达STING-HA的293T细胞；④共同表达STING-HA与与NRLP14-FL的293T细胞，如下所示：

再看第二部分WB的图，WB的图就是使用含有FLAG抗体的珠子拉下来的蛋白做的，使用拉下来的这些蛋白再做WB，它的原理前面已经描述过了。使用FLAG抗体的珠子拉下来的蛋白使用HA抗体来进行检测，其结果如下：

从上面的图像可以看出以下信息：

第一， HC与LC条带都非常明显，之所以出现这个条件是因为，在WB之前进行的蛋白变性这一步，由于加样缓冲液中含有巯基乙醇，巯基乙醇会把抗体的重链和轻链之间的二硫键破坏，从而使的抗体变成重链分子55KD和轻链分子25KD，因此会在结果中呈现两个条带。

第二， 第一组（只表达HA-cGAS的293T细胞）中没有条带，第二组（共同表达HA-cGAS与NRLP14-FL的293T细胞）没有条带，第三组（只表达STING-HA的293T细胞）有一点点条带，第四组（共同表达STING-HA与与NRLP14-FL的293T细胞）条带明显，这说明NLRP14与STING有相互作用，为什么说有相互作用呢？因为我们是用FLAG抗体来拉的蛋白，从理论上讲，我们只能拉下FLAG标记的NLRP14，也就是NLRP14-FL（FL就是FLAG），但是，从拉下的蛋白中用HA进行检测，居然检测出来了HA标记的STING，这就说明，使用FLAG拉NLRP14-FL时，这个蛋白复合物中含有STING-HA。

再看图的第三部分，也就是下面的这一部分，是用FLAG抗体和HA抗体来进行检测整个细胞的裂解液，是作为阳性对照（有的文献中会标明input组），如下所示：

其中右侧的WCL表示的是整个细胞的裂解液，也就是还没有使用FLAG抗体的珠子去拉的时候的样本，也就是说直接裂解了293T细胞后的样本，从这个结果中可以得到以下信息：

第一， 在使用FLAG抗体进行检测全蛋白时，相当于阳性对照。第一组（只表达HA-cGAS的293T细胞）中没有条带，因为这种293T细胞中只有HA标记的cGAS，第二组（共同表达HA-cGAS与NLRP14-FL的293T细胞）有条带，因为FLAG抗体能检测出使用了FLAG标记的NLRP14，NLRP14的蛋白分子量大概是125kD，第三组（只表达STING-HA的293T细胞）没有条带，因此这种293T细胞只表达HA标记的STING；第四组（共同表达STING-HA与与NLRP14-FL的293T细胞）条带明显，因为这个细胞中含有FLAG标记的NLRP14。

第二， 使用HA抗体检测全蛋白，这是阳性对照，是说明细胞中含有相应的蛋白。我们可以发现，第一组（只表达HA-cGAS的293T细胞）在27kD附近没有条件，在50kD部分有条带，这说明，全蛋白中含有HA标记的cGAS（cGAS的蛋白分子量是62kD，多数蛋白标签的分子量很少，基本可以忽略），做这个实验主要是作为阳性对照；第二组（共同表达HA-cGAS与NLRP14-FL的293T细胞）在37kD附近没有条带，在50kD附近有条带；结合前面的结果来看，就说明这个细胞中含有HA标记的cGAS（因为它的分子量大概是50kD），还含有FALG标记的NLRP14（因为NLRP14的蛋白分子量大概是125kD）；第三组（只表达STING-HA的293T细胞）在37kD处有条带，这说明细胞中含有HA标记的STING（因为STING的分子量大概是35kD）；第四组（共同表达STING-HA与与NLRP14-FL的293T细胞）在110kD处有条带，在37kD处也有条带，这说明这种细胞中含有NLRP14与STING。

从上面的可以知道，在做Co-IP实验时。需要设立阳性对照组来证明你的细胞中有某个蛋白A与B，再使用抗蛋白A的抗体来拉A蛋白，再使用抗蛋白B的抗体来检测拉下来的蛋白，如果检测到了蛋白B，就说明蛋白A与蛋白B有相互作用。

答案：免疫沉淀是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀，从而保留下来，其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单，裂解细胞后，加入抗体，抗原被沉淀下来后洗涤，去除非特异性结合，再分析复合体。抗体可以是单克隆，也可以是多克隆。

　　一

　　Internet历史

　　1969年,美国国防部的高级研究计划署

　　（Advanced Research Project Agency，简称ARPA）开展异地计算机互联，形成了Internet的前身 – ARPAnet

　　1977-1979年，ARPAnet推出了目前形式的TCP/IP体系结构和协议。

　　1986年，美国国家科学基金会NSF （National Science Foundation） ，采用TCP/IP协议将分布在美国各地的6个为科研教育服务的超级计算机中心互联，并支持地区网络，形成 NSFnet，替代ARPAnet成为Internet的主干网。

　　1989年改名为Internet向公众开放

　　1994年美国的Internet由商业机构全面接管

　　中国Internet历史

　　第一阶段（1989-1994初）---以E-mail为主要应用的国际互联网间接连接

　　第二阶段（1992-19944）与国际互联网的全功能直接连接，即国际Internet开通

　　第三阶段（19944-现在）--- 1994年4月，中国首次加入了Internet，全面铺开Interent建设。

　　详见：中国Internet的发展回顾

　　http://wwwcncaccn/gb/news/news_special/5_years/ztyj/ppt/ybp1/tsld001htm

　　中国互联网络信息中心wwwcnnicnetcn 负责国内IP地址、域名申请登记

　　1996年形成中国四大互联网络

　　CERNET中国教育科研网

　　中国教育和科研计算机网网址为：wwweducn

　　CSTNET中国科技网

　　中国科技网网址为：wwwcstnetnetcn wwwcncaccn

　　ChinaGBN中国金桥网 国家公用经济信息通信网

　　中国金桥信息网网址为：wwwgbcomcn

　　ChinaNet中国公用互联网 面向公众提供计算机国际联网服务

　　中国电信网址为：wwwchinatelecomcomcn

　　其它互联网络单位

　　另：

　　中国联通互联网(UNINET ) wwwchinaunicomcomcn

　　中国网通公用互联网(CNCNET) wwwcncnetcn

　　中国移动互联网(CMNET) wwwchinamobilecom

　　中国国际经济贸易互联网(CIETNET) wwwcietnet

　　中国长城互联网(CGWNET) wwwcgwnetcn

　　中国卫星集团互联网(CSNET) wwwchinasatcomcn

　　国际出口带宽

　　我国国际出口带宽的总量为：18599M。连接的国家有美国、加拿大、澳大利亚、英国、德国、法国、日本、韩国等。分布情况如下（2003-7）

　　中国科技网(CSTNET)：55M

　　中国公用计算机互联网(CHINANET)：10959M

　　中国教育和科研计算机网(CERNET)：324M

　　中国联通互联网(UNINET)：1435M

　　中国网通公用互联网（网通控股）(CNCNET)：2112M

　　宽带中国CHINA169网（网通集团）：3465M

　　中国国际经济贸易互联网(CIETNET)：2M

　　中国移动互联网(CMNET)：247M

　　中国长城互联网(CGWNET)：（建设中）

　　中国卫星集团互联网(CSNET)：（建设中）

　　2004年1月15日 CNNIC发布第十三次中国互联网络发展状况统计报告，有新发展http://wwwcnniccn/html/Dir/2004/01/15/2080htm

　　到2003年12月31日，我国国际出口带宽的总容量为27216M

　　Internet定义

　　Internet是一个由各种不同类型和规模的、独立运行和管理的计算机网络组成的世界范围的计算机系统。中文名称为“国际互连网”、“因特网”、“网际网”等。所有人都可以通过网络的连接来共享和使用网上各种各样的信息。

　　基于TCP/IP协议的网间网

　　ISP(Internet Service Privider) 因特网服务提供商

　　ICP (Internet Content Privider) 因特网内容提供商

　　Internet的基本工作原理

　　分组交换

　　利用每台计算机每次只能传送一定数据量的方式来保证各台计算机平等地使用共享资源

　　网际协议IP

　　传输控制协议TCP

　　客户机与服务器（C/S结构）

　　客户机发出数据库或信息查询请求，主机中的服务器程序接受此请求并以特定格式回答，再由客户机程序识别后显示给用户。

　　Client/Server建立在局域网的基础上。

　　浏览器与服务器（ B/S结构）

　　用户界面完全通过不断成熟的WWW浏览器技术，结合浏览器的多种Script语言(VBScript、JavaScript…)和ActiveX技术，实现了原来需要复杂专用软件才能实现的强大功能，并节约了开发成本。

　　Browser/Server建立在广域网的基础上。

　　Internet 改变世界

　　信息获取与发布

　　E-mail

　　网上交流

　　电子商务

　　网络电话、传真

　　网络办公

　　远程教育、远程医疗、网络游戏等

　　上网人数：5910万 （男:593％ 女:407%）

　　中国网民数量统计图

　　Internet的基本功能

　　最基本的功能有3个：电子邮件、远程登录 、文件传输 。

　　电子邮件：internet上使用最广泛，是internet上最重要、最基本的应用，可以传递文字、图象、声音等多种媒体信息，可以将信息同时发给多个接受者，还可以转发第三者，他比实时传真慢，但费用便宜。

　　远程登录：用户通过telnet命令，使自己的计算机暂时成为远地计算机的终端，直接调用远地计算机上对外开放的资源，可查询数据库、检索资料，或利用远程计算机完成只有巨型计算机才能做的工作，internet上的许多服务是通过telnet访问来实现的。

　　文件传输：FTP（File transfer protocol）用户在两个联网的计算机之间传输文件，可免费获取Internet上丰富资源。

　　除了以上基本服务外，还具有：

　　新闻组（usenet news）:网络专题的公开讨论

　　电子公告牌BBS：发布信息或提出看法

　　网络聊天MSN,ICQ :在线传送信息、交谈、发送文件和语音

　　查询服务（Finger）

　　全球网络资源（Wold Wide Web）

　　IP地址

　　IP（Internet Protocol）地址，即用Internet协议语言表示的地址

　　32位二进制数，分成四段，段间圆点间隔，每段八位，可用一小于256的十进制数表示

　　IP地址包含两部分内容：一部分为网络地址，另一部分为主机地址

　　为适应不同网络规模的要求，IP地址主要分为A、B、C三类，此外还有D类(多址广播地址)，E类(实验性地址)

　　如我校网站地址：21035742

　　IP地址

　　IP地址空间

　　第一个字节 网络地址数 网络主机数 主机总数

　　A类网络 0－127 128 2(8-1) 16777214 224-2 2147483392

　　B类网络 128－191 16384 2(16-2) 65534 216-2 1073709056

　　C类网络 192－223 2097152 2(24-3) 254 28-2 532676608

　　总计 2113664 16843002 3753869056

　　A类: 0000~127255255255 第1段为网络地址，大型网络

　　B类: 128000~191255255255 第1,2段为网络地址，中型网络

　　C类: 192000~223255255255 第1,2,3段为网络地址，小型网络

　　D类 224 ~ 239 D类作多点传送而保留的广播地址

　　E类 240 ~ 254 E类是实验性地址

　　在A类地址中127xyz保留给回路(loopback)测试

　　每个字节（8位）中的全1不分配（即不能为255），第一个字节全0表示本地网络地址

　　那些IP地址属内部网址

　　以下范围内的IP地址属局域网 (内网)地址：

　　10000 - 10255255255

　　1721600 - 17231255255

　　16925400 - 169254255255

　　19216800 - 192168255255

　　局域网内的计算机可以访问Internet上的计算机，但Internet上的计算机无法直接访问局域网内的计算机。

　　动态、静态IP地址

　　动态主机配置协议DHCP(Dynamic Host Configuration Protocol) 对网络中的IP地址进行自动分配。

　　动态IP地址：是多个用户公用几个IP地址,每次用户拨号入网时, 通过DHCP从ISP那里动态得到IP地址的动态分配一个IP地址。

　　分配的ip地址常变 （今天和昨天的ip地址不一样，这此上网和2小时前不一样）， 则为动态ip地址。

　　静态IP地址：是ISP为某些用户设置的专用IP地址，分配的IP地址总不变（每天上网ip地址都一样）， 则是固定的静态IP地址。

　　注：

　　局域网内的计算机虽然ip地址也不变，但不等同于外部计算机，它们不能通过向CNNIC,ISP等电信服务机构申请获得静态IP地址。

　　建立网站的前期准备工作

　　家庭或办公室建站

　　电话线、ISDN 、ADSL 、CABLE MODEN，采用动态ip上网的家庭用户，可通过PeanutHull20 、DNS2GO、山外山等软件，注册动态域名。

　　入网方式与上相同，但通过局域网、校园网上网的用户（内部网址） ，可通过Web山外通，注册动态域名。

　　参考下载网址

　　http://wwwskycncom/soft/6352html

　　http://wwworaynet/

　　http://wwwe3y3com/

　　域 名

　　域名系统DNS(Domain Name System)

　　负责将Internet上主机的域名转化为计算机能识别的IP地址

　　是一个分层次定义，分布式管理的命名系统，每一层构成一个子域名，子域名之间用圆点隔开，自左至右分别为：计算机名网络名机构名最高域名。域名的顺序和IP地址正好相反。它的工作就是将域名地址转化为IP地址。

　　http://wwwshifteducn 21035742

　　外贸学院校园网络中心WWW服务器的域名

　　查找上海交大、复旦、263网站的域名地址

　　查找域名对应的IP地址（使用ping命令）

　　域名结构

　　顶层域名－组织域

　　域 名 表示的组织或机构的类型

　　com 商业机构

　　edu 教育机构或设施

　　gov 非军事性的政府机构

　　int 国际性机构

　　mil 军事机构或设施

　　net 网络组织或机构

　　org 非赢利性组织机构

　　顶层域名－地理域

　　域 名 表示国家或地区

　　cn 中华人民共和国

　　hk 中国香港

　　mo 中国澳门

　　tw 中国台湾

　　sg 新加坡

　　uk 英国

　　fr 法国

　　jp 日本

　　中国二级域名体系－类别域

　　二级域名 表示类别

　　ac 科研院及科技管理部门

　　com 工、商和金融等企业

　　edu 教育单位

　　gov 国家政府部门

　　net 互联网络、接入网络信息和运行中心

　　org 各社会团体及民间非赢利组织

　　中国二级域名体系－行政区域

　　二级域名 行政区域

　　bj 北京

　　sh 上海

　　tj 天津

　　cq 重庆

　　js 江苏

　　zj 浙江

　　gd 广东

　　sn 陕西

　　域名举例

　　请分析以下域名所属的行业、国家（地区）：

　　万维网/环球网WWW

　　在因特网上以超文本为基础形成的信息网

　　Internet上一个大型图书馆，Web节点就象图书馆中的一本本书，Web页则是书中的某一页

　　主页(HomePage)是某一个Web节点的起始点，就象一本书的封面或目录

　　URL(Universal Resource Locator)

　　统一资源定位符：每个Web页唯一地址

　　http://wwwtsinghuaeducn/chn/yxsz/indexhtm

　　http://210357535:8080/opac/index1htm

　　浏览器－1

　　Internet Explorer

　　Netscape Communicator

　　启动IE，输入网址

　　跳转(超级链接)、前进/后退

　　在新窗口打开链接(右键、Shift+点击)

　　IE开新窗口，多窗口浏览

　　如何保存(、文字、网页)

　　工具→选项→临时文件(设置、删除)，历史记录

　　浏览器－2

　　设置浏览首页

　　工具→Internet选项→常规→主页→地址

　　浏览时不显示

　　工具→Internet选项→高级→多媒体→显示

　　改变显示文字大小(工具栏按钮，查看→文字大小)

　　显示BIG5码汉字(查看→编码)

　　选择曾经浏览过的网站

　　地址栏点击下拉箭头，在列表中选择某网站

　　收藏夹 收藏网址（右键）

　　注意收藏的是网站地址，不是搜索链接

　　停止，刷新，历史

　　搜 索

　　随堂作业 1

　　IE保存操作

　　我校校园网首页的整个网页保存到c:\test文件夹中

　　在首页中提取并剪裁我校校徽图案，保存为c:\test\校徽jpg

　　可采用工具软件：snagit 或 附件中的画图（如实例1）。

　　在首页中复制第一段文字到记事本或Word中，如：保存为c:\test\新闻txt

　　IE收藏夹操作

　　建立“大学” ， “新闻”两个文件夹

　　在“大学”中收藏北大、清华、复旦、交大的网址

　　可访问 http://wwweducn，再进入“教育资源”网页……

　　在“新闻”中收藏教育部、新浪、中央电视台的网址

　　上述三项操作完成后，采用snagit截取收藏夹（如实例2），保存为c:\test\收藏夹截图jpg

　　随堂作业 2

　　搜索操作

　　位于西安的名胜古迹大雁塔初建时有几层？

　　A七层 B三层 C五层 D六层

　　我国最早的人口普查数字大约是：

　　A436万 B1355万 C5958万 D4万万

　　李林在血常规检验报告单中看到一项指标（WBC）偏高，请问WBC是指什么？

　　A血小板计数 B白细胞计数 C红细胞计数 D血红蛋白

　　手机上有个未接电话号码：58796391，回电前想先搜索一下该电话是从上海的哪个区打来的？

　　A长宁区 B黄埔区 C卢湾区 D浦东新区

　　名菜“宫保鸡丁”中的“宫保”本意是指什么？

　　A菜名 B菜谱名 C地名 D官名 E人名

　　搜索结果保存到c:\test\搜索练习txt，其中只需填入题号和所选答案即可。

　　作业打包

　　检查c:\test文件夹中是否存在：

　　一个htm网页文件和一个对应的子文件夹

　　两个jpg文件

　　两个txt文本文件

　　以您的机号（两位数）+姓名+IE作业rar ，为文件名将上述内容压缩（打包），作为发送邮件的附件。

　　下面介绍如果发送邮件

　　二

　　启用OE前的邮件账号设置

　　你的E_mail地址

　　0101001@shifteducn

　　账户名（用户名）：你的学号

　　密 码：身份证号码后五位（最后位可能为 x 或 X ）

　　容 量：2M

　　工具→账户→邮件→添加→邮件→

　　（如果存在其他同学的账号请一定要先删除）

　　显示姓名(发件人名称)→填入你的姓名

　　电子邮件地址(回复地址) →填入你的真实E-mail地址

　　POP3收信服务器：我校收信服务器地址mailshifteducn

　　SMTP发信服务器：我校发信服务器地址mailshifteducn

　　账户名→填入你的账户名

　　密码→填入你的密码

　　记住密码→选择打勾

　　工具→账户→邮件→选中当前账户→属性→服务器→

　　“我的服务器要求身份验证”前选择打勾

　　随堂作业

　　文件→新建→邮件→（或创建邮件）

　　收件人→

　　老师邮箱的用户名@shifteducn

　　主题 →机号（两位数）+姓名+IE作业

　　邮件正文 → 随便写一句话，或对本课程的建议

　　最后附上你的学号、姓名、班级

　　邮件可有背景（如：创建邮件下拉菜单中的晴朗等）

　　分割线（插入→横线）

　　附件→选择c:\test文件夹中的您打包后的作业文件，

　　如：01 张三 IE作业rar

　　点击发送

　　检查“发件箱”文件夹中的邮件是否存在邮件，存在则说明没有发送出去

　　检查“已发送邮件”文件夹中的是否存在邮件，存在则说明发送完毕

　　撰写邮件实例

　　申请免费E-mail信箱

　　在citiz或sohu申请一个免费E-mail

　　申请citiz免费E-mail的网址：

　　mailcitiznet

　　或http://citizonlineshcn/indexjsp

　　注意查看常见问题中提到的收信服务器（POP3）和发信服务器（SMTP）等信息

　　发信、收信服务器

　　发信服务器

　　SMTP发信服务器（发信邮局）

　　简单邮件传输协议Simple Mail Transfer Protocol

　　我校松江的发信服务器： mailshifteducn

　　收信服务器

　　POP3收信服务器（收信邮局）

　　Post Office Protcol 3

　　我校松江的收信服务器： mailshifteducn

　　你在哪里拥有账号，就到那里的收信服务器中取信

　　常用smtp、pop3服务器对照表

　　OE基本设置

　　发送/接收服务器可同机或不同(包括异地)

　　收件人、抄送(cc)、密送(bcc)

　　多人：用分号或逗号隔开Email地址

　　通讯簿及其应用（导入/导出）

　　加入附件

　　将文字、、声音等文件作为附件发出

　　接收电子邮件附件的处理

　　打开（注意病毒）

　　保存

　　工具→选项→安全→中的“不允许保存或打开可能有病毒的附件”选项含义

　　查看电子邮件属性

　　OE高级设置

　　多账号设置

　　保留邮件备份

　　工具→账户→邮件→选中当前账户→属性→高级→

　　在服务器上保留邮件副本

　　身份验证

　　工具→账户→邮件→选中账号→属性→服务器→

　　我的服务器要求身份验证

　　OE邮件规则

　　邮件→从邮件创建规则， 阻止发件人

　　工具→ 邮件规则→ 邮件→

　　规则条件、规则操作、规则说明、规则名称

　　作用

　　阻止垃圾邮件

　　分门别类存放(先建好文件夹)

　　OE其它操作

　　文件夹

　　结合邮件规则将收到的E-mail分发到不同的文件夹

　　工具→将发件人添加至通信薄

　　保存电子邮件

　　菜单：文件 → 另存为

　　剪贴板 （保存邮件正文的部分内容）

　　打印电子邮件

　　查看→排序方式， 列， 布局

　　邮件安全

　　利用数字证书、PKI、对称加密算法、数字签名、数字信封等加密技术，可以建立起安全程度极高的加解密和身份认证系统，确保电子交易有效、安全地进行，从而使信息除发送方和接收方外，不被其他方知悉（保密性）；保证传输过程中不被篡改（完整性和一致性）；发送方确信接收方不是假冒的（身份的真实性和不可伪装性）；发送方不能否认自己的发送行为（不可抵赖性）。

　　认证中心（CA—Certificate Authority）作为权威的、可信赖的、公正的第三方机构，专门负责发放并管理所有参与网上交易的实体所需的数字证书。它作为一个权威机构，对密钥进行有效地管理，颁发证书证明密钥的有效性，并将公开密钥同某一个实体（消费者、商户、银行）联系在一起。

　　主要应用于：网上报税、办公、招标、交易、邮件和工商管理

　　数字证书：个人或单位在 Internet上的身份证，通过运用对称和非对称密码体制等密码技术建立起一套严密的身份认证系统 。

　　数字签名：指发送者根据消息产生摘要，并对摘要用自身的签名私钥加密。消息和用自身签名私钥加密的数字摘要组合成数字签名。

　　E-key：又称电子钥匙，其实是一种带有统一规定的加密算法，能够解密规定加密数据，并能存储数字证书的一种专用硬件存储介质。

　　电邮卡车

　　电邮卡车是一个通过E-mail网关服务器访问HTTP、FTP的工具。通常如果是您需要几分钟才能连接上的网页，或是只能以02k/秒的速度下载的文件，或者您干脆不能直接访问的地址（如169 A/B类用户常遇到的），电邮卡车可以用E-mail帮您处理这一切。而您要做的只是填一下URL，或者只是“Copy to clipboard”。电邮卡车的基本技术和Mr Cool是完全一样的，但却是以完全超过Mr Cool为目标设计的。在Mr Cool中常见的Bug没有了，监视对话框弹出在最顶端，发送队列失败时不会死循环。又增添了批处理、源文件下载功能，更强大的监视设置。而且界面绝对让您耳目一新。

　　邮件特快专递

　　有时候您可能会遇到这种情况：需要立刻把电子邮件快速地发送到您的朋友的手中，但是使用普通的电子邮件发送方式，不能保证邮件被立刻送到对方邮箱。

　　Foxmail提供了邮件特快专递功能，它的特点就是能够找到收件人邮箱所在的服务器，直接把邮件送到对方的邮箱中。这样，当您发送完毕后，您的朋友就可以立刻收到邮件了。

　　使用邮件特快专递功能，只要在写完邮件后，点击“邮件”菜单或者工具栏的“特快专递”即可。

　　注意：特快专递只能发给一个收件人，并且在收信人处只能填写一个邮件地址。

　　另外，邮件特快专递功能需要调用域名服务器(DNS)查询收件人邮箱对应的IP地址，所以必须在系统中填写域名服务器地址。如果在Windows系统的ICP/IP属性对话框中填写了域名服务器地址，Foxmail会自动取得并使用该地址。用户也可以通过Foxmail菜单的“选项”|“系统设置”，在弹出的对话框中选择“邮件特快专递”，填写域名服务器IP地址。可以填写两个域名服务器地址，也可以只填写第一个。

　　Foxmail的特快转递

　　需调用域名服务器(DNS)查询收件人邮局对应的IP地址

　　若Windows系统的TCP/IP属性中填写了域名服务器地址，Foxmail自动使用该地址

　　设置Foxmail菜单：选项→系统设置→ 邮件特快专递，填写域名服务器IP地址

　　贸院的DNS服务器IP地址：21035721

　　上海电信的DNS服务器IP地址：

　　20296199133 202960133

　　查找当地DNS服务器

　　如果不清楚当地的DNS服务器IP地址，可通过以下方法获取：

　　对于Windows2000/XP系统，通过点击Windows“开始”|“程序”|“附件”|“命令提示符”，打开命令提示符窗口，执行“ipconfig /all”命令，列出的信息中将包含“DNS Servers” IP 地址信息。

　　对于Windows98系统，可通过Windows“开始”菜单的“运行”，执行“winipcfg”命令，从弹出对话框的“详细信息”中“DNS服务器”一栏查看。

　　电子邮件应用

　　新闻组(News Group)

　　newswebkingcomcn

　　newsstanetcn

　　newszjcninfonet

　　订阅免费电子杂志(邮件列表Mailing List)

　　wwwtomcom/maillist

　　mlist163com

　　邮件贺卡

　　cards163com

　　练 习

　　将老师的E-mail地址和你的其他地址存入地址薄

　　使用OE发信

　　收件人:

　　第1,2节课：slx@shifteducn

　　第3,4节课：slx1@shifteducn

　　抄送： 你自己和你的其他E-mail地址

　　密送：

　　第1,2节课：pc@shifteducn

　　第3,4节课：pc1@shifteducn

　　主题：练习二05号机张三

　　练 习

　　使用OE发信（续上页）

　　注意正文必须使用纯文本格式

　　按所用计算机的机号将“射雕英雄传”相应第几回

　　(41-80之间减40， 80以上减80)的标题和前200字作为邮件正文，并在最后署上专业、汉字姓名

　　将外贸学院主页右下角的作为附件

　　检查一下，可以发送啦！

　　练 习

　　在OE中建立文件夹Teacher

　　建立邮件规则，可将来自老师的邮件自动放入Teacher文件夹

　　将某邮件另存为文件

　　OE与其它邮件收发软件的比较

　　Foxmail的优势

　　远程邮箱管理

　　访问口令功能

　　邮件特快转递功能

　　八

　　关于网络防火墙

　　断开（恢复）网络

　　系统设置

　　定制安全级别

　　详细信息

　　程序规则

　　安全日志

　　计算机网络

　　指在网络协议基础上以共享资源、互相通信为目的而连结起来的自治的计算机互联系统的集合体

　　功能：资源共享

　　通信手段(电子邮件、协同工作)

　　网络分类

　　局域网(LAN, Local Area Network)

　　小范围，一个办公室或一个建筑物

　　广域网(WAN, Wide Area Network)

　　覆盖几十千米或几百千米甚至整个地球

　　城域网(MAN, Metropolitan Area Network)

　　专指覆盖一个城市的计算机网络

　　网络拓扑结构

　　计算机物理连接方式

　　总线型

　　一台计算机发出报文，网上计算机都接受到

　　只有一台真正接收（目标地址）

　　优点：简单，易于使用掌握，所用线缆少

　　缺点：效率低，难以维修

　　网络拓扑结构：总线

　　网络拓扑结构

　　星型

　　HUB 集线器转发

　　优点：易扩充，可靠性强，维护方便

　　缺点：HUB故障，网络瘫痪

　　所用线缆较多

　　网络拓扑结构：星型

　　网络拓扑结构

　　环形

　　令牌传输，令牌循环

　　获得令牌才能发送信息

　　优点：每台计算机都有令牌访问权限，没有一台计算机能垄断网络，公平共享网络资源

　　缺点：可靠性差，故障诊断困难，增减计算机干扰网络运行

　　网络拓扑结构:环形

　　网络适配器

　　网络适配器 → 网卡，MAC地址

　　插入计算机主板插槽内

　　主板集成

　　连入网络类型 以太网，环网

　　传输媒体（网线）类型 RJ45，BNC

　　计算机使用的总线类型 ISA，PCI

　　调制/解调器 Modom

　　电话线

　　Modom

　　ISDN Modom

　　ADSL Modom

　　有线电视线

　　CABLE Modom

　　电源线

　　电力Modom ，

　　社区专线FTTB+LAN

　　无线

　　Wireless modom

　　传输媒体(1)

　　传输媒体→ 线缆媒体、无线媒体

　　线缆媒体

　　双绞线

　　非屏蔽双绞线(UTP,Unshielded Twisted-Pair)

　　几对互相缠绕的电线封装在一个塑料套管中

　　三类线：传输速率10Mbps

　　五类线：传输速率100Mbps

　　连接距离：100米之内

　　屏蔽双绞线(STP,Shielded Twisted-Pair)

　　外面加了一层屏蔽, 500Mbps, 费用高

　　传输媒体(2)

　　同轴电缆

　　中心铜线，外面绝缘层，再外面金属网组成的屏蔽层，最外面套管

　　10Mbps，数百米，便宜

　　光纤

　　100Mbps到2Gbps

　　数千米，保密性好

　　无线媒体

　　无线电系统，地面微波系统，卫星微波系统，红外线传输系统

　　双绞线

　　光纤

　　网络连接

　　网络连接设备:

　　集线器(HUB)

　　由于信号在网络传输介质中有衰减和噪音，使有用的数据信号变得越来越弱，因此为了保证有用数据的完整性，并在一定范围内传送，要用中继器把所接收到的弱信号分离，并再生放大以保持与原数据相同。

　　中继器(Repeater)

　　集线器（Hub可以说是一种特殊的中继器，作为网络传输介质间的中央节点，它克服了介质单一通道的缺陷。以集线器为中心的优点是：当网络系统中某条线路或某节点出现故障时，不会影响网上其他节点的正常工作。集线器可分为无源（Passive）集线器、有源（Active）集线器和智能（Intelligent）集线器。

　　交换机(Switch)

　　网络交换技术一种结构化的网络解决方案。它是计算机网络发展到高速传输阶段而出现的一种新的网络应用形式。使现有网络技术通过交换设备提高性能。

　　网络连接

　　网间互联设备:

　　网桥(Bridge)

　　网桥（Bridge）是一个局域网与另一个局域网之间建立连接的桥

EGP绿荧光蛋白(GreenFluorescentPortein，GFP)它的27kDa的单体由238个氨基酸构成，本身就是一个生物发光系统，附带有激发后能发射生物荧光的发光色基，其发光过程不同于其它生物发光组织，是不需荧光素酶参与的。光激发GFP荧光是一个特异性的独立过程，并不需要任何的协同因子、底物或其它来自于水母的基因表达产物。当能量由Ca2+-激活光蛋白(Aequorin)传给GFP时引发荧光(Wardetal。，1980)。野生型GFP(wtGFP)的克隆及其在异源系统中等表达使其成为一种新的遗传标记系统(prasheretal,1992;Inouye&Tsuji,1994a;Wang&Hazelrigg，1994)。当GFP在原核或真核细胞中表达并受到蓝光或紫外光辐照时就可发出亮绿色荧光。GFP色基GFP色基是由丝氨酸酪氨酸甘氨酸(SerTyrGly)形成的环化三肽所构成，并且只有色基包被在完整的GFP蛋白中才能发出荧光(Codyetal,1993)，被切断的GFP(即使是C末端的少数几个氨基酸)亦能导致GFP失去发光能力。GFP和GFPS65T的晶体结构研究表明色基紧密地包被在由α折叠围成的β盒中(Ormetal,1996;Yangetal,1996)。这一结构提供了色基发射荧光的微环境，该环境排除了基质及氧对色基发光的影响。只具备一级结构GFP是不能发光的，功能性色基的形成是在转录翻译后，并经历一个环化反应和一个需分子氧的氧化步骤。色基高级结构的形成可能是荧光蛋白形成的限速步骤，特别是分子氧受到限制时(Heimetal,1994;Davisetal,1995)。wtGFP吸收紫外和蓝光，其吸收峰为λmax＝395nm和λmin＝470nm，发射峰为λ＝509nm。EGFP是GFP突变系(1)RedShifted(红偏移)GFP突变系(EGFP&GFPS65T)色基发生了氨基酸取代，λmax(Excitation)偏移至490nm附近。红偏移突变系的最大激发峰都落在常用滤色片的波长范围内，所以获得的荧光信号要比wtGFP明亮得多。同样，FACS和共焦显微镜的氩离子光源的发射波长为488nm，对RedShifted突变系的激发效率也明显高于wtGFP。EGFP发生了双氨基酸取代，Leu(亮氨酸)取代Phe64(苯丙氨酸)，Thr(苏氨酸)取代Ser65(丝氨酸)(Cormacketal,1996)。基于等量溶解蛋白的光谱分析，由于Em(消光系数)的增加和色基构型的高效率，EGFP在488nm处激发后灯荧光强度为wtGFP的35倍(Cormacketal,1996;Yangetal,1996)。在相同条件下(489nm)测得EGFP得Em为53，000cm-1M-1，而wtGFP为9，500CM-1M-1，GFPS65T为55，000cm-1M-1(Pattersonetal,1997)。EGFP的色基构型在37℃比wtGFP或GFPS65T发光效率更高，在这一温度下表达的EGFP可溶性蛋白95%为有效色基(Pattersonetal,1997)。GFPS65T为Thr取代Ser65的突变体(Heimetal,1995)，同样条件下，它的荧光强度强于wtGFP4～6倍，并且其唯一的Redshifted激发峰位于490nm，但37℃时色基形成的效率不如EGFP。你可以两个都试试，应该都没有问题的上边的我也是看了这个网址后给你发的，我感觉挺好的，还有不明白的，你自己看看吧，那里还有很多东西我没给你拷过来cn/periodical/periodicalarticles/jgswxb/jgsw99/jgsw9903/990315htm